Práctica extracción de ADN
Para cada grupo
Materiales:
- 10 ml de agua destilada
- 1/8 banana madura (muestra para extraer ADN)
- 1 mortero y su mano
- 2 vasos de pptdo. 100 mL
- Solución SDS 10 %
- 10 ml de Etanol absoluto en hielo o congelado previamente
- Solución NaCl 0,4 M
- 1 probeta de 100 mL
- 1 Varilla de vidrio
- 1 tubo de ensayo
- 2 pipetas de 5 ó 10 mL
- 1 propipeta.
- 1 embudo.
- 1 malla de nylon
Protocolo experimental. Trabajar todo
en frio (c/hielo)
En uno de los vasos de precipitado, preparamos 10 ml de
solución SDS 2% NaCl 0,4 M. Reservamos
la solución.
En el mortero colocamos el octavo de banana y 10 mL de H2O
dest. Pisamos con el almirez hasta formar una pasta homogenea.
Agregamos la pasta formada a la solución de detergente y
sal, mezclamos sin levantar espuma. Dejamos actuar 10 minutos.
Filtramos a través de la
malla de nylon.
Tomamos 5 mL del filtrado y lo colocamos en un tubo de
ensayo enfriado en hielo.
Con una pipeta
volcamos por las paredes del tubo de ensayo el etanol frio hasta que se forme
una interfase turbia. Dejamos reposar 5 minutos en frio.
Sumergimos la varilla
de vidrio en la zona turbia y giramos lentamente para enrollar el ADN a la
varilla.
No hay comentarios:
Publicar un comentario